BET 蛋白酶靶向嵌合治疗新型Richter转化DLBCL模型

慢性淋巴细胞性白血病向Richter转化，发展成为耐药进展型弥漫大B 细胞淋巴瘤。Richter综合征伴随的DLBCL(RT-DLBCL)根据B细胞克隆演化特点，分为克隆相关型(CLR)和克隆无关型(CLUR)。前者中位生存期1年，后者5年。本文成功获得了克隆相关型(CLR)、克隆无关型(CLUR) 以及生发中心型 DLBCL PDX细胞模型，并研究了CLL来源的RT-DLBCL与治疗敏感性关系的研究，探索了新型疗法的靶点特征。

方法：

1. RT-DLBCL的PDX细胞模型，使用BET抑制剂、BET-PROTAC+伊布替尼、维奈托克 处理
2. 流式细胞检测鉴定免疫亚型，鉴定指标包括CD19、CD5、CD10、CD20、CD23、PD-1、IgG-isotype
3. 泛BET降解剂ARV-771、BET bromodomain 抑制剂OTX015处理样本后进行RNA测序
4. 单细胞测序检测RT-DLBCL的细胞克隆亚型

成果：

• 本文利用单细胞测序发现，发现：克隆相关型RT-DLBCL共有12种细胞分群，克隆无关型共有7种细胞分群，生发中心型共有7种分型，显示克隆相关型细胞分群更加复杂。

• 分析各PDX模型的细胞分群标志物发现：MYC、MCL、BIRC3在克隆无关型PDX模型中具有生物标志物价值，而IRF4与TCF4高表达于克隆相关型和克隆无关型，却不表达于生发中心型。

• IRF4、TCF4具有细胞特异性高表达，而且具有针对BET蛋白抑制剂高敏感的特点。

• 使用CRISPR敲除IRF4降低c-Myc水平，进而增强BET蛋白酶抑制剂的敏感性。 使用BET-PROTAC和维奈托克处理细胞，表现了对 RT-DLBCL 细胞的协同抑制效应。，显著减少淋巴瘤负荷，并改善免疫缺陷小鼠经CLR-RT-DLBCL后的移植存活率。